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网友爆料蒙牛你连丽春红都洗不掉还敢让人放心喝?

时间:2013-04-19 00:15:08  来源:泉城在线  作者:正义联盟 已有条跟贴

泉城 在线讯 蒙牛牛奶质量一直备受质疑,最近新浪微博一位网友爆出蒙牛你连丽春红都洗不掉还敢让人放心喝?“,那么这个丽春红是神马呢?

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丽春红(Ponceau S)染色液的配制及使用

Molecular Formula: C22 H12 N4 Na4 O13 S4

Molecular Weight::760.6

CAS Number: 6226-79-5

λ : 520 nm (water)

丽 春红(Ponceau S)也称猩红,可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测。丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。丽 春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。

丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。因此,蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜,用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。

注意:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。

使用说明

将 PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中,摇动5-10分钟或更长时间;取出印迹膜,用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次, 可出现清晰条带,记录结果;用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除丽春红,进行后续的WB检测。

补充:丽春红染色液也可以直接用来染PAGE胶,不过,在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE胶,起到固定蛋白的作用。

丽春红染色液的配制

常用的丽春红染色液有两种:一种用乙酸配制,另外一种用三氯乙酸(TVA)和5-磺基水杨酸(5-Sulfosalicylic acid)配制。配制方法如下:

一、用乙酸配制成分:0.1%(w/v)丽春红,5%(v/v)乙酸,ddH2 O。

4 ℃保存,不要冻上。也可以配成“0.2%(w/v)丽春红,3%(v/v)乙酸,ddH2 O”。

二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分:2% (w/v)丽春红,30%的三氯乙酸,30%的5-磺基水杨酸。

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